下列哪项属于血小板血型抗原的基因分型检测技术

admin2019-01-20 28

问题下列哪项属于血小板血型抗原的基因分型检测技术

选项 A、PIFT
B、MAIPA
C、放射免疫沉淀
D、PCR-SSP
E、ELISA

答案D

解析血小板免疫荧光试验(platelet antibodies detection by immunofluorescence test，PIFT)是Von-den Borne等于1978年发明的。该法用待测血清孵育已知血小板，洗涤，再与荧光物标记的抗球蛋白反应后洗涤，在荧光显微镜下观察结果。该法是较为可靠的血小板定型方法，1986年被国际血小板血清学研讨会确定为标准的参考方法。单克隆抗体免疫固定血小板抗原方法(monoclonal antibodyspecific immobization of platelet antigen，MAIPA)是1987年Kiefel等确立的，是目前使用最为广泛的方法。该法先制备羊抗鼠IgG包被的多孔板，另外，将鼠抗人血小板糖蛋白单克隆抗体和带有抗体的血小板共同孵育，再将孵育后的复合物加入多孔板，孵育，洗涤，最后加入酶联羊抗人抗体和酶反应底物后显色，定量测定血小板抗体。此方法敏感度高、特异性强，即使是血小板上抗原数量很少的HPA-5抗原，也能检测出。MAIPA方法也可灵敏地检测血小板特异性抗体。放射免疫沉淀是使用放射性同位素标记的血小板膜蛋白，与受检血清结合，电泳分离后采用自身显影原理检测是否存在血小板抗体。单克隆抗体酶联免疫吸附试验用多聚甲醛固定抗血小板糖蛋白单克隆抗体后，加入待测血清，最后加辣根过氧化酶标记的羊抗人IgG，用底物邻苯二胺(O—phenylene diamine，OPD)显色。上述方法均属于血清学方法。而PCR-SSP(seqlaence specific primet)即序列特异引物引导的PCR反应。其基本原理是设计特异性引物，利用引物3^’端的特异性，直接扩增相应的HPA片段，PCR产物凝胶电泳检测DNA条带的存在或缺失，从而确定基因型。

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