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医学
聚合酶链反应(PCR)目的是
聚合酶链反应(PCR)目的是
admin
2014-07-30
40
问题
聚合酶链反应(PCR)目的是
选项
A、测定基因碱基组成与退火之间的关系
B、测定基因碱基组成与变性之间的关系
C、扩增基因片段
D、将大量DNA片段变性
E、将大量DNA片段退火
答案
C
解析
聚合酶链反应(PCR):(1)PCR技术采用特异性的引物,能特异性地扩增出目的DNA片段。(2)由于在基因顺序中突变区两侧的碱基序列和正常基因仍然相同,因此,根据待测基因两端的DNA序列设计出一对引物,经PCR反应将目的基因片段扩增出来,即可进一步分析判断致病基因的存在与否,并了解其变异的形式。(3)PCR反应体系中有:模板DNA、一对引物、嗜热的DNA聚合酶(一般为Taq DNA聚合酶)、4种dNTP(底物)、缓冲液。(4)引物是根据需要扩增的DNA序列(靶DNA)的3’端设计并合成的,两个引物(长约20个核苷酸)分别互补于模板DNA的两条链,方向相对。(5)PCR反应大约需要30个循环,每个循环的反应有3步:①变性(约94℃),高温变性,双螺旋解离成单链;②退火(约55℃),一对引物分别和两条模板链的3’端互补;③延伸(约72℃),在模板的指导下,Taq DNA聚合酶从每个引物的3’端开始合成一条新链。经过约30个循环以后,靶DNA的拷贝数一般可以扩增10。倍(理论上10
8
倍)。(2003)
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