枯草杆菌蛋白酶(相对分子质量27600)是一种能催化某些氨基酸酯和酰胺水解的细菌蛋白酶。对于合成的底物N一乙酰一L一酪氨酸乙酯(Ac一Tyr一OEt),枯草杆菌蛋白酶的Km与Kcat分别是150 mol/L和550 s-1。 (1)当枯草杆菌蛋白酶

admin2019-08-28  34

问题 枯草杆菌蛋白酶(相对分子质量27600)是一种能催化某些氨基酸酯和酰胺水解的细菌蛋白酶。对于合成的底物N一乙酰一L一酪氨酸乙酯(Ac一Tyr一OEt),枯草杆菌蛋白酶的Km与Kcat分别是150 mol/L和550 s-1
    (1)当枯草杆菌蛋白酶的浓度是0.40 g/L时,Ac一Tyr一OEt水解的Vmax是多少?
    (2)吲哚是枯草杆菌蛋白酶的竞争性抑制剂,抑制常数K1为0.05 mol/L,当吲哚为6.25 mmol/L时,计算Ac一Tyr一OEt被0.40 g/L枯草杆菌蛋白酶水解的Vmax
    (3)计算0.40 g/L枯草杆菌蛋白酶与0.25 mol/L的Ac一Tyr一OEt和1.0 mol/L吲哚共同存在时的V0

选项

答案(1)首先计算枯草杆菌蛋白酶的浓度,然后计算Vmax。 [E]=(0.40 g/L)/(27600g/mol)=1.45×10-5mol/L Vmax=Kcat.[E]=8.0×10-5mol/(L.s) (2)由于吲哚是竞争性抑制剂,因此对于该酶催化的反应在有无抑制的条件下,Vmax是相同的。应注意到,在竞争性抑制的速度方程中和在双倒数作图中,Vmax都不受[I]的影响,因此Vmax为8.0×10-3 mol/(L.s) (3)利用竞争性抑制作用的速度方程 [*] V0=5.9×10-4 mol/(L.s)

解析
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